泥鳅为底栖鱼类，栖息于河流、湖泊、沟渠水田、池沼等各种浅水多淤泥环境水域的底层。昼伏夜出，适应性强，可生活在腐殖质丰富的环境内。水中缺氧时，能跳跃到水面吞入空气进行肠呼吸。在水池干涸时，潜入泥中，只要泥土有少量水分保持湿润，便不致死亡。泥鳅广泛分布于亚洲沿岸的中国、日本、朝鲜、俄罗斯及印度等地。
泥鳅白天大多潜伏在泥中，喜上半夜外出觅食，如果环境安静，有时白天也出来活动。据养殖户观察，泥鳅在一昼夜间有两个明显的摄食高峰，上午8-9点和下午3-5点。而早晨5点左右为摄食低潮。在人工养殖条件下，白天投喂是完全可以的。一般情况下，泥鳅肠胃中的食物为其体重的8-10%；在繁殖季节，摄食量则更大些，泥鳅不同生长阶段的食物是不完全一样的。
泥鳅一般2龄时开始性成熟。其繁殖季节是4-9月，6-7月为繁殖盛期。通常情况，19℃以上开始产卵，24℃左右产卵量大，繁殖活动强烈。泥鳅是一年多次产卵的鱼类，产卵常在雨后夜间进行，有时白天也产。产卵活动期间，泥鳅胆子较大，常到水面上来追逐。泥鳅卵有黏性，卵在水中受精后，粘在水草或水中杂物上孵化，落入水底的受精卵也能孵出仔鳅。